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赖氨酸铁琼脂(LIA)培养基的原理及使用方法

2024-07-17

一、试验原理

本培养基用于食品中沙门氏菌生化试验,可检测肠杆菌科细菌的赖氨酸脱羧酶和产硫化氢试验,特别用于检测沙门氏菌和亚利桑那菌。

蛋白胨和酵母浸粉为微生物的生长提供氮源等营养物质,葡萄糖为可发酵的碳源,溴甲酚紫为酸碱指示剂,有些细菌可以发酵葡萄糖,产酸使培养基斜面先变黄,后由于斜面接触空气而被氧化生成碱性物质,而底层不会被氧化,因此呈现斜面紫色底层黄色的现象;有的细菌同时具有赖氨酸脱羧酶,使赖氨酸脱羧产碱,使底层变为紫色,出现斜面紫色底层紫色的现象;有些细菌可还原硫代硫酸钠产生硫化氢,与柠檬酸铁铵反应产生黑色沉淀;琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方(g/L


三、试验方法

1、称取本品32.0g,加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌15 min,冷至60℃左右时,制成斜面。

2、将质控菌株划线后穿刺接种到培养基上。

3、放置于35±1℃恒温培养箱中需氧培养24±2小时。

四、结果观察

接种以下质控菌株,放置于35±1℃恒温培养箱中需氧培养24±2小时。


图1 赖氨酸铁琼脂(LIA)培养基微生物质控结果

注:同样用来检测食品中沙门氏菌的三糖铁琼脂(TSI)培养基,变形杆菌表现出的现象与多数沙门氏菌(包括亚利桑那沙门氏菌)相同,都表现为斜面红色、底层黄色、部分区域有黑色,不容易区分。但是在赖氨酸铁琼脂(LIA)培养基上,变形杆菌不能使赖氨酸脱羧产碱,所以表现出斜面紫色、底层黄色,底层有黑色沉淀,可以将变形杆菌与沙门氏菌区分开,如图2。

图2 赖氨酸铁琼脂(LIA)培养基培养结果