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Bolton肉汤的简单介绍

2024-07-09

一、培养基用途:

   用于空肠弯曲菌的增菌(GB标准)。
二、培养基成分及使用方法:
   1.培养基成分

成分
含量(g/1000mL)
动物组织酶解物
10.0
乳白蛋白水解物
5.0
酵母浸粉
5.0
氯化钠
5.0
α-酮戊二酸
1.0
丙酮酸钠
0.5
偏亚硫酸氢钠
0.5
碳酸钠
0.6
pH(25℃) 7.2±0.2
    2.使用方法
   称取本品 27.6g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,每瓶100mL,121℃高压灭菌15min,冷却至45-50℃时,每瓶培养基加入5mL无菌裂解脱纤维羊或马血和1支Bolton肉汤添加剂,混匀,备用。
    注:培养基高压灭菌后有少量沉淀。
三、原理:

    动物组织酶解物和乳白蛋白水解物提供碳源、氮源;酵母浸粉提供各种维生素;氯化钠维持渗透压;丙酮酸钠和偏亚硫酸氢钠能中和培养基的有毒物质,也能增强菌的耐氧性,有助于未死受损细菌细胞的复苏;α-酮戊二酸提供生长因子,促进空肠弯曲菌的生长;碳酸钠提供空肠弯曲菌最有利的PH生长环境;Bolton肉汤添加剂中,头孢哌酮和多黏菌素B抑制革兰氏阴性菌,万古霉素和三甲氧苄胺嘧啶乳酸盐抑制革兰氏阳性菌,两性霉素B抑制酵母、霉菌的生长。

四、实验结果:

   1.按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,在42±1℃微需氧培养24-48h。由于该培养基加入脱纤维羊血或马血后培养基颜色较深,难以观察试管中是否有菌生长,所以用无抗生素CCD和TSA检验是否有菌生长。

质控菌株
菌株编号
接种量(CFU)
参比或计数培养基
方法
生长情况
其他特征
空肠弯曲菌
ATCC33291
10-100
无抗生素CCD
半定量
在CCD上>10CFU
在CCD上菌落呈灰白色
大肠埃希氏菌
ATCC25922
1000-5000
TSA
半定量
在TSA上<100CFU
/
金黄色葡萄球菌
ATCC6538
1000-5000
TSA
半定量
在TSA上<100CFU
/

1  Bolton肉汤微生物质控结果

a:空白对照,b:空肠弯曲菌,c:大肠埃希氏菌,d:金黄色葡萄球菌