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V-J琼脂培养基的原理和使用方法

2024-03-25

一、试验原理:

本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。

明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露醇为可发酵糖类;酚红为酸碱指示剂;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄;琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方(g/L):


三、试验方法:

1、称取本品61.0g,加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15min,冷至45-50℃左右时,加入20 mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀,倾入无菌平皿。

2、制备质控菌液,接种到培养基上。

3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

四、结果观察与解释

接种以下质控菌株,放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量

回收率

生长情况

其它特征

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

10-100

70%

+++

黑色菌落,

菌落周围黄色

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

10-100

70%

+++

黑色菌落,

菌落周围黄色

表皮葡萄球菌

CMCCB26069

10-100

70%

+++

黑色菌落,

菌落周围不变色

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

/

抑制


图1 V-J琼脂培养基微生物质控结果

a:金黄色葡萄球菌ATCC 25923;b:金黄色葡萄球菌ATCC 6538;

c:表皮葡萄球菌CMCC(B)26069;d:大肠埃希氏菌ATCC 25922