一、试验原理:
本培养基用于副溶血性弧菌神奈川现象试验。
蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;7%氯化钠可以抑制一些非弧菌的细菌生长,不影响副溶血性弧菌生长;磷酸氢二钾为pH 缓冲剂;甘露醇为可发酵的醇;结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;兔血红细胞用于检测副溶血性弧菌是否具有特定溶血素;琼脂为凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
氯化钠 |
70.0 |
磷酸氢二钾 |
5.0 |
甘露醇 |
10.0 |
结晶紫 |
0.001 |
琼脂 |
15.0 |
pH 8.0 ± 0.1 25℃ |
三、试验方法:
1、称取本品11.3 g,溶解于100 mL蒸馏水中,加热灭菌30分钟,待冷至50℃左右时,按5%的体积加入新鲜兔血球,混匀后倾入无菌平皿中,无需高压灭菌。
2、制备质控菌液,定点接种到培养基上。
3、放置于37℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置于37℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 |
其它特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC 33847 |
/ |
菌落周围有半透明β溶血环 |
副溶血性弧菌 |
ATCC 17802 |
/ |
无溶血 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
无溶血 |
溶澡弧菌 |
ATCC 21664 |
/ |
无溶血 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
无溶血 |
五、注意事项
1.我妻氏培养基基础需搭配兔红细胞使用,方为我妻氏血琼脂培养基。
2.平板倾注不要太厚,以免影响溶血现象的观察。