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我妻氏培养基基础的原理和使用方法

2024-03-18

一、试验原理:

本培养基用于副溶血性弧菌神奈川现象试验。

蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;7%氯化钠可以抑制一些非弧菌的细菌生长,不影响副溶血性弧菌生长;磷酸氢二钾为pH 缓冲剂;甘露醇为可发酵的醇;结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;兔血红细胞用于检测副溶血性弧菌是否具有特定溶血素;琼脂为凝固剂。

二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

酵母浸粉

3.0

氯化钠

70.0

磷酸氢二钾

5.0

甘露醇

10.0

结晶紫

0.001

琼脂

15.0

pH 8.0 ± 0.1 25

三、试验方法:

1、称取本品11.3 g,溶解于100 mL蒸馏水中,加热灭菌30分钟,待冷至50℃左右时,按5%的体积加入新鲜兔血球,混匀后倾入无菌平皿中,无需高压灭菌。

2、制备质控菌液,定点接种到培养基上。

3、放置于37℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。

四、结果观察与解释

接种以下质控菌株,放置于37℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。

质控菌株

菌株编号

接种量

其它特征

副溶血性弧菌

ATCC 33847

/

菌落周围有半透明β溶血环

副溶血性弧菌

ATCC 17802

/

无溶血

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

/

无溶血

溶澡弧菌

ATCC 21664

/

无溶血

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

/

无溶血

五、注意事项

1.我妻氏培养基基础需搭配兔红细胞使用,方为我妻氏血琼脂培养基。

2.平板倾注不要太厚,以免影响溶血现象的观察。