一、试验原理:
本产品是青岛海博生物技术有限公司改良的培养基,主要用于食品、水、牛奶、冰激凌、肉制品中大肠杆菌的显色培养及快速检测。
特殊营养物质提供微生物生长所需的碳氮源和微量元素,维持均衡的渗透压,并提供针对革兰氏阳性细菌的选择性,特别是杆菌和粪链球菌;显色剂是由发色团和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶靶定作用下,游离出产色因子用于合成细胞使菌落显示颜色。在TBX培养基上,大肠杆菌菌落显蓝绿色,其它菌显黄色或无色。
二、培养基配方(g/L)
三、试验方法:
1.称取本品36.6g,加入1000 mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热溶解并不停搅拌,煮沸不超过1 min,分装三角瓶,121℃,15 min灭菌,备用;
2.质控菌液按国标、SN标准、FDA标准或其它方法制备而成;
3.取1ml样品液加入无菌平皿中,倾入冷却至45-50℃的培养基混匀;或待培养基冷却至45-50℃时倾倒平板,待凝固后开盖吹15-30min,取100μL适当稀释度的样品液涂布于培养基上,36±1℃倒置培养18-24 h;
4.选用有30-200个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
四、试验结果判断:
1.外观
此干燥培养基粉末均匀,呈乳白色,煮沸灭菌后制备好的固体平板为无色透明状。
2.生物学实验
接种以下质控菌株,放入培养箱中,于36±1℃倒置培养18-24h,观察试验结果。
表2 TBX培养基不同菌株质量控制结果
图1 TBX培养基微生物质控结果
a:大肠埃希氏菌ATCC 25922;b:大肠埃希氏菌CMCC 44102;c:沙门氏菌ATCC 14028;
d:产气肠杆菌CMCC 45108;e:阴沟肠杆菌ATCC 23355;f:金黄色葡萄球菌ATCC 25923