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CCFA琼脂培养基的简单介绍

2025-03-17

一、 培养基用途：
用于艰难梭菌的选择性分离培养。
二、培养基成分及使用方法：
1.培养基成分（g/L）

胰蛋白胨	10.0
牛肉浸粉	10.0
酵母粉	3.0
葡萄糖	1.0
可溶性淀粉	1.0
氯化钠	5.0
碳酸氢钠	0.4
L-半胱氨酸盐酸盐	0.5
丙酮酸钠	1.0
L-精氨酸	1.0
焦磷酸盐	0.25
果糖	6.0
琥珀酸	0.5
氯化血红素	0.01
中性红	0.03
琼脂	13.2
pH 7.2±0.2	25℃

2.使用方法
称取本品 53.20g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶200mL。121℃高压灭菌15min，冷却至45-50℃时，每200mL培养基加入50%卵黄乳液10mL、无菌环丝氨酸0.1g和无菌头孢西丁3.2mg。混匀，倾入无菌平皿，备用。
三、检验原理：
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐酸盐、L-精氨酸、焦磷酸盐、氯化血红素、琥珀酸、丙酮酸钠提供碳源、氮源、维生素和生长因子；果糖为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；中性红是酸碱指示剂，酸性条件变黄；琼脂是培养基凝固剂；环丝氨酸和头孢西丁可抑制杂菌和其他梭菌；50%卵黄乳液可检验是否产脂酶，艰难梭菌不产生脂酶故无沉淀环。
四、实验结果：
1.按使用方法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35℃厌氧培养48小时。

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	生长情况	其他特征
艰难梭菌	ATCC43593	/	生长良好	黄色菌落，无沉淀环
产气荚膜梭菌	ATCC13124	/	抑制	/

2.艰难梭菌在培养基上的生长情况如下图所示：

图1 CCFA琼脂培养基微生物质控结果

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