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碱性琼脂培养基原理及实验现象

2024-11-04

一、用途:

用于霍乱弧菌分离培养。

二、实验原理:

蛋白胨、牛肉浸粉提供氮源、维生素和矿物质,氯化钠维持均衡的渗透压,牛胆盐抑制革兰氏阳性菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂,偏碱性的pH有利于弧菌的生长,并能抑制部分杂菌的生长。

三、培养基配方(g/L

蛋白胨
20.0
牛肉浸粉
5.0
氯化钠
5.0
牛胆盐
5.0
琼脂
12.0
PH 8.3-8.5

此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

四、试验方法:

1、称取本品 47.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15min,备用。

2、制备质控菌液。

3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。

4、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。

五、结果观察与解释

接种以下质控菌株,在36±1℃下培养18-24小时:

质控菌株
菌株编号
接种量(CFU)
回收率
生长情况
其他特征
副溶血性弧菌
ATCC17802
10-100
≥70%
+++
无色透明菌落
霍乱弧菌
/ 10-100
≥70%
+++
无色透明菌落,扁平湿润


a:副溶血性弧菌 b:霍乱弧菌


六、注意事项

本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。