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葡萄糖酸盐试验原理与方法

2024-06-17

一、用途及原理

  此试验常用于绿脓杆菌和双歧杆菌的生化鉴定。

  蛋白胨和酵母粉提供基本营养需求;磷酸氢二钾调节培养基的pH;葡萄糖酸钾可被某些细菌分解成还原性的葡萄糖,然后与班氏试剂发生反应生成砖红色沉淀。

二、培养基配方(g/L)

蛋白胨
1.5
酵母粉
1.0
磷酸氢二钾
1.0
葡萄糖酸钾
40.0
pH值7.0±0.2    25

  班氏试剂配方(g/L)

柠檬酸钠
173.0
碳酸钠
100.0
五水硫酸铜
17.3

  1.挑取待测菌的单菌落至无菌生理盐水中,制备约109CFU/mL浓度菌悬液。

  2.吸取100微升菌悬液加入到葡萄糖酸盐生化管中,并放置于36±1℃,需氧条件下培养24±2小时(若培养双歧杆菌,需厌氧培养)。

  3.培养结束后按1:1的比例加入班氏试剂,并将生化管置于沸水浴中水浴1-10分钟,冷却后观察结果。如出现砖红色沉淀,则为阳性;若颜色依为浅蓝色,则为阴性。

三、实验结果



a:大肠埃希氏菌ATCC25922b:铜绿假单胞菌ATCC27853c:铜绿假单胞菌ATCC9027d:空白对照