一、用途及原理
此试验常用于绿脓杆菌和双歧杆菌的生化鉴定。
蛋白胨和酵母粉提供基本营养需求;磷酸氢二钾调节培养基的pH;葡萄糖酸钾可被某些细菌分解成还原性的葡萄糖,然后与班氏试剂发生反应生成砖红色沉淀。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
1.5 |
酵母粉 |
1.0 |
磷酸氢二钾 |
1.0 |
葡萄糖酸钾 |
40.0 |
pH值7.0±0.2 25℃ |
班氏试剂配方(g/L)
柠檬酸钠
173.0
碳酸钠
100.0
五水硫酸铜
17.3
1.挑取待测菌的单菌落至无菌生理盐水中,制备约109CFU/mL浓度菌悬液。
2.吸取100微升菌悬液加入到葡萄糖酸盐生化管中,并放置于36±1℃,需氧条件下培养24±2小时(若培养双歧杆菌,需厌氧培养)。
3.培养结束后按1:1的比例加入班氏试剂,并将生化管置于沸水浴中水浴1-10分钟,冷却后观察结果。如出现砖红色沉淀,则为阳性;若颜色依为浅蓝色,则为阴性。
三、实验结果
a:大肠埃希氏菌ATCC25922;b:铜绿假单胞菌ATCC27853;c:铜绿假单胞菌ATCC9027;d:空白对照